-->
|
|
|
Ïðàêòè÷åñêàÿ ðàáîòà ¹ 5 Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ áåëêîâ è âûïîëíåíèå îïûòîâ ñ íèìèÖåëü ðàáîòû: çàêðåïëåíèå çíàíèé î ñâîéñòâàõ áåëêîâ. Çàäàíèå.  ñîîòâåòñòâèè ñ íèæåïðèâåäåííûìè îïèñàíèÿìè è èñõîäÿ èç èìåþùåãîñÿ â âàøåì ðàñïîðÿæåíèè îáîðóäîâàíèÿ ïðèãîòîâüòå îäèí-äâà áåëêîâûõ ðàñòâîðà1 è âûïîëíèòå îïûòû ïî äåíàòóðàöèè áåëêîâ è öâåòíûå ðåàêöèè: áèóðåòîâóþ è êñàíòîïðîòåèíîâóþ2. 1 Åñëè âðåìÿ ðàáîòû îãðàíè÷åíî, âîñïîëüçóéòåñü âûäàííûì ó÷èòåëåì ãîòîâûì ðàñòâîðîì ÿè÷íîãî áåëêà.
Ñîñòàâüòå â òåòðàäè îò÷åò î âûïîëíåííîé ðàáîòå ïî ôîðìå, ïðåäëîæåííîé ó÷èòåëåì. 1. Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ áåëêîâ (íà âûáîð).1.1. Ðàñòâîð áåëêîâ ìîëîêà — àëüáóìèíà è ãëîáóëèíà. Ê 20-25 ìë ìîëîêà ïðèáàâüòå ðàâíûé îáúåì âîäû. Çàòåì âëåéòå, ïîìåøèâàÿ, 1-3 êàïëè êîíöåíòðèðîâàííîé óêñóñíîé êèñëîòû — ïðè ýòîì îáðàçóþòñÿ áåëûå õëîïüÿ. Äàéòå ðàñòâîðó ïîñòîÿòü 5-10 ìèíóò è îòôèëüòðóéòå ÷åðåç ïîëîòíÿíûé ôèëüòð, ïðåäâàðèòåëüíî ñìî÷åííûé âîäîé. Ïåðâûå ìóòíûå ïîðöèè ôèëüòðàòà ïîâòîðíî ïðîôèëüòðóéòå. Ïîëó÷åííûé ÷óòü æåëòîâàòûé ðàñòâîð ñîäåðæèò àëüáóìèí è ÷àñòü ãëîáóëèíà ìîëîêà, à òàêæå ìîëî÷íûé ñàõàð (ëàêòîçà). Îáðàçîâàâøèéñÿ íà ôèëüòðå îñòàòîê íå âûáðàñûâàéòå, òàê êàê îí ïîíàäîáèòñÿ â ñëåäóþùåì îïûòå. 1.2. Ðàñòâîð êàçåèíà ìîëîêà. Îñòàòîê, ïîëó÷åííûé íà ôèëüòðå (ïîñëå ïðîâåäåíèÿ ïåðâîãî îïûòà) è ñîñòîÿùèé, â îñíîâíîì, èç áåëêà êàçåèíà è ìîëî÷íîãî æèðà, ïåðåíåñèòå â ôàðôîðîâóþ ÷àøêó è äîáàâüòå îêîëî 1 ìë 30 %-ãî ðàñòâîðà ãèäðîêñèäà íàòðèÿ, ñëåãêà ðàçîòðèòå è ïðèëåéòå âîäó äî îáùåãî îáúåìà 10-15 ìë. Ïîëó÷åííóþ ñìåñü ïðîôèëüòðóéòå ñ ïîìîùüþ áóìàæíîãî ôèëüòðà, ïðåäâàðèòåëüíî ñìî÷åííîãî âîäîé. Ïåðâûå ìóòíûå ïîðöèè ôèëüòðàòà ñëåäóåò ïðîôèëüòðîâàòü åùå ðàç, èñïîëüçóÿ òîò æå ôèëüòð. 1.3. Ðàñòâîð æåëàòèíà.  ïðîáèðêó ñ âûäàííûìè êðèñòàëëàìè æåëàòèíà (0,1 ã) äîáàâüòå 10 ìë âîäû è íàãðåéòå äî ðàñòâîðåíèÿ êðèñòàëëîâ. Äîáàâüòå 1-2 êàïëè 5 %-ãî ðàñòâîðà ãèäðîêñèäà íàòðèÿ. Æåëàòèí îáðàçóåòñÿ â ðåçóëüòàòå ñâåðòûâàíèÿ êîëëàãåíà, îáðàáàòûâàåìîãî êèïÿùåé âîäîé. 2. Îïûòû ñ ðàñòâîðàìè áåëêîâ.2.1. Ñâåðòûâàíèå áåëêîâ ïðè íàãðåâàíèè.  ïðîáèðêó íàëåéòå 2-3 ìë ðàñòâîðà èñïûòóåìîãî áåëêà è íàãðåéòå åãî â ïëàìåíè ñïèðòîâêè äî êèïåíèÿ â òå÷åíèå 30-60 ñåêóíä. Áîëüøèíñòâî áåëêîâ ïðè ýòîì âûïàäàþò â îñàäîê. Ðàñòâîð æåëàòèíà ïðè íàãðåâàíèè íå ñâåðòûâàåòñÿ.
|
|
|